導(dǎo)讀：近期，漢騰生物創(chuàng)始人兼CEO沈瀟博士受邀參加2023杭州國際生物技術(shù)與質(zhì)量大會，并于大會上作“新型抗體開發(fā)策略”的主題演講。沈瀟博士從細(xì)胞株構(gòu)建、工藝開發(fā)、分析方法開發(fā)以及制劑開發(fā)等角度介紹了漢騰生物雙特異性抗體（雙抗）和lgM的開發(fā)策略。
自1982年人工胰島素上市以來，生物醫(yī)藥領(lǐng)域經(jīng)歷了很多革命性產(chǎn)品，比如單克隆抗體（單抗）、重組疫苗、反義寡核苷酸藥物、基因與細(xì)胞治療等。在2022年全球藥品銷售額TOP10榜單中，生物藥已占六席，銷售額達(dá)1178億美元（占比70%）；而全球藥物Top100榜單中，單抗、雙抗、ADC（抗體偶聯(lián)藥物）、重組蛋白、疫苗等生物藥已有56個。如今，抗體類藥物迎來井噴式發(fā)展，新型抗體藥物的開發(fā)技術(shù)突飛猛進(jìn)，取得諸多成就。
漢騰生物作為一站式、全流程的生物藥CRDMSO服務(wù)企業(yè)，也積極參與新型抗體的開發(fā)，幫助創(chuàng)新藥企加速產(chǎn)品研發(fā)和創(chuàng)新。目前我們已在雙抗和lgM的CMC開發(fā)中取得了重要突破。
漢騰生物雙抗開發(fā)策略
雙抗研發(fā)已有60多年歷史，早期主要從片段式開始，發(fā)展至今有9個雙抗/雙功能融合蛋白上市，其中8個都是非對稱性結(jié)構(gòu)，1個是對稱性結(jié)構(gòu)。由于雙抗的結(jié)構(gòu)較單抗更為復(fù)雜，在CMC開發(fā)也存在一些難點與挑戰(zhàn)。目前，漢騰生物在雙抗這一領(lǐng)域，無論對稱結(jié)構(gòu)和非對稱結(jié)構(gòu)都已積累了豐富的經(jīng)驗。
首先通過In-silico分析等方法對雙抗進(jìn)行氨基酸序列分析，提前預(yù)測質(zhì)量及結(jié)構(gòu)上的風(fēng)險點以及關(guān)鍵質(zhì)量參數(shù)等，從分子角度對其穩(wěn)定性及功能進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計，為后續(xù)的工藝開發(fā)（包括表達(dá)體系、細(xì)胞培養(yǎng)、純化和制劑工藝）提供理論支持。
漢騰生物擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的CHO細(xì)胞系以及人源細(xì)胞系GEX，對于一些特殊糖基化修飾要求的抗體也可選擇有糖基化修飾不同傾向的GEX細(xì)胞系。結(jié)合質(zhì)粒平臺、信號肽密碼子優(yōu)化和高通量篩選平臺，漢騰生物的雙抗細(xì)胞株的產(chǎn)量可達(dá)8g/L。
上游工藝開發(fā)：漢騰生物擁有從搖瓶到2000L的放大經(jīng)驗，除了傳統(tǒng)攪拌式反應(yīng)器，針對宿主細(xì)胞比較脆弱或者蛋白比較敏感容易聚集的雙抗，我們還可以采用比較溫和的環(huán)軌式反應(yīng)器。
下游工藝開發(fā)：雙抗由于其結(jié)構(gòu)復(fù)雜性以及多種不同的構(gòu)型，可能會產(chǎn)生不同種類的錯配構(gòu)型。漢騰生物針對不同類型的雙抗也開發(fā)出相應(yīng)的技術(shù)路線，對高分子量聚集以及非目標(biāo)構(gòu)型的去除具有良好的效果，最終達(dá)到98%以上的純度。
漢騰生物lgM開發(fā)策略
人體有l(wèi)gG、lgD、lgE、lgA、lgM 5種抗體，已上市的治療產(chǎn)品主要集中在lgG 這一種類型。國際上越來越多科研者在開發(fā)除lgG以外的抗體，例如lgA（二聚體）和lgM（五聚體）這類多價抗體，因其綜合效價大大增強。
關(guān)于lgM的開發(fā)，已有文獻(xiàn)記載其產(chǎn)量非常低。漢騰生物在高表達(dá)IgM方面具有豐富經(jīng)驗，IgMax®平臺是漢騰生物自主研發(fā)的平臺，通過特殊設(shè)計的載體系統(tǒng)，細(xì)胞株產(chǎn)量可達(dá)8g/L，并且IgM構(gòu)型均一，五聚體比例100%，無六聚體產(chǎn)生，從源頭避免后續(xù)六聚體難去除風(fēng)險。
為應(yīng)對lgM五聚體的大分子量結(jié)構(gòu)，漢騰生物在工藝開發(fā)階段也做了諸多優(yōu)化，例如在下游階段開發(fā)了兩條純化路線（包括親和層析和非親和層析），均可達(dá)到97%以上純度，宿主細(xì)胞蛋白殘留（HCP）控制較好（HCP<100ppm），回收率達(dá)到＞55%。此外，理化表征分析、生化分析、制劑開發(fā)和原液生產(chǎn)也均配套完善，可有效解決IgM的開發(fā)及生產(chǎn)難題。
