漢騰生物在動物細胞系的馴化，優(yōu)化和開發(fā)方面，擁有行業(yè)領(lǐng)先的知識、專利技術(shù)儲備以及豐富的項目技術(shù)經(jīng)驗。目前，漢騰生物與其歐洲子公司FyoniBio GmbH聯(lián)合推出CHOzen®和GLYCOEXPRESS® (GEX®)細胞系，背景資料完整，來源清晰，能夠滿足客戶多樣化的需求，可提供靈活的定制化服務。
CHOzen® 細胞系技術(shù)平臺包含長期懸浮馴化的CHO-K1及CHO-DG44細胞株，適合單抗，雙抗，融合蛋白等多種重組生物大分子蛋白表達及穩(wěn)定高表達細胞株構(gòu)建的需求。憑借漢騰卓越的自有表達載體設計及克隆開發(fā)技術(shù)體系，可構(gòu)建出單位體積產(chǎn)量超過10g/L的高產(chǎn)細胞株，工藝優(yōu)化后可突破20g/L。此外，漢騰生物歐洲團隊開發(fā)的GLYCOEXPRESS® (GEX®)細胞系平臺，源自人類髓性白血病細胞系，可賦予天然蛋白、抗體、融合蛋白等多種重組生物大分子蛋白復雜人源糖基化特征，并排除非人源糖基化特征的負面影響。同時漢騰生物技術(shù)團隊還利用細胞工程、生物信息學、系統(tǒng)生物學及合成生物學技術(shù)，開發(fā)出三種針對不同糖型修飾的細胞系，可定制化高效生產(chǎn)復雜糖蛋白。結(jié)合該平臺配套的自主知識產(chǎn)權(quán)的表達載體，培養(yǎng)基體系及培養(yǎng)工藝，我們能為客戶提供靈活的定制化服務和完整的開發(fā)策略。
CHOzen® 細胞系——最經(jīng)典卻并不平凡的細胞系平臺
細胞株在生物制造工藝中具有舉足輕重的地位，穩(wěn)定，高產(chǎn)的細胞株能夠降低生產(chǎn)工藝的復雜度以及成本，賦予生產(chǎn)工藝更高的效率并帶來更高的生物制品利潤。因此，歷史背景清晰，可開發(fā)性強的宿主細胞系顯得尤為重要。
CHO細胞又稱中國倉鼠卵巢細胞，最早由T.Puck教授于1957年從中國倉鼠卵巢中提取獲得，1958年細胞被進行克隆后，得到原始CHO-ori細胞系。
CHO-K1細胞株源自于原始CHO-ori細胞系的一個亞克隆，是未經(jīng)改造的野生型CHO細胞，其于1970年被分離后存放于ATCC（CCL-61）。1985年，ATCCCHO-K1的一個亞克隆被分離后保存于ECACC（85051005）。漢騰生物的CHO-K1來源于ECACC，并通過長期馴化適應于無血清懸浮培養(yǎng)的CD培養(yǎng)基中，其生長狀態(tài)良好，細胞株產(chǎn)量高，穩(wěn)定性良好，并已在單抗、重組蛋白以及生物類似藥項目中廣泛使用。
圖1 生物制藥工業(yè)生產(chǎn)糖蛋白的表達系統(tǒng)
CHO-DG44細胞株來源于哥倫比亞大學Lawrence Chasin實驗室，是雙等位DHFR基因敲除的CHO宿主細胞株，完全缺失DHFR基因的活性。使得MTX加壓篩選過程更加有效，產(chǎn)量提升更加顯著。經(jīng)過漢騰國內(nèi)外團隊的長期馴化后，已適應無血清懸浮培養(yǎng)及高產(chǎn)量重組蛋白的表達。CHO-DG44屬于最早廣泛用于工業(yè)蛋白生產(chǎn)的CHO細胞系之一。目前仍然在國際上被廣泛使用于治療性重組蛋白產(chǎn)品的開發(fā)。CHOzen®細胞系中的CHO-K1，CHO-DG44細胞株具有不同的生長特性，代謝活動和翻譯后修飾，可根據(jù)目標蛋白情況選擇以滿足不同項目需求。
GEX®細胞系——專門針對不同糖基化修飾需求的細胞系平臺
目前，在生物藥研發(fā)與生產(chǎn)中，糖蛋白大多在CHO細胞等鼠源細胞系中進行，但嚙齒動物生產(chǎn)系統(tǒng)（CHO 和 BHK）缺乏 α2-6 唾液酸化途徑，只能產(chǎn)生具有免疫原性 NeuGc修飾來代替 NeuAc，致使生物藥的安全性方面的擔憂。
GEX®系列細胞系具有不同程度的糖基化修飾傾向，如唾液酸化和巖藻糖糖基化的調(diào)整以及改善的半乳糖基化水平和分支模式。
圖2 特定的蛋白糖基化類型對生物大分子蛋白的影響
漢騰技術(shù)團隊在原始GEX-mAbExpress的基礎(chǔ)上通過細胞工程、生物信息學、系統(tǒng)生物學及合成生物學等技術(shù)，開發(fā)出SIALOMAX®、FUCOFLEX®、SIALOFLEX®三種針對不同糖型修飾類型的細胞系，可定制化高效生產(chǎn)復雜糖蛋白。其中：
SIALOMAX® 適用于高唾液酸含量的蛋白
FUCOFLEX® 適用于需調(diào)控巖藻糖含量的蛋白
SIALOFLEX® 適用于需調(diào)控唾液酸含量的蛋白項目
圖3 GLYCOEXPRESS® 系列細胞系滿足不同糖基化需求
此外，GEX®細胞系技術(shù)平臺開發(fā)了流加批次培養(yǎng)及灌流培養(yǎng)生產(chǎn)工藝。目前IgG產(chǎn)量可達30g/L、IgA可達15g/L、雙抗可達5g/L、重組血液因子可達4g/L，并具有良好的可放大性（10ml-1000L）及工藝可重復性。應用GEX®細胞系生產(chǎn)的多個項目已在美國和歐洲開展臨床試驗。